上期向大家分享了熔解曲线3个峰，本期我们继续深入了解PCR相关知识，想要回顾之前几期内容和获取新知识的老师们，可以扫描下方微信二维码，关注我们华博官方微信服务号。

1、产物可以进行电泳检测吗？

产物是可以用来电泳的，不过由于定量PCR借助于荧光的作用灵敏度较高，电泳产物则一般条带不会很亮。

2、为什么阴性产物进行二次扩增也有较强的荧光信号（据Ct值可判为阳性）？且电泳似乎也有较亮的条带，无法与阳性产物区别。

如果阴性有扩增，说明PCR体系被污染了，PCR污染是很可怕的，而且很难消除。

产物的二次扩增在定量PCR中一般是不建议做的，原因很简单，片段太短了，还是那个问题，定量PCR是高灵敏度的，再二次扩增很难排除二聚体、PCR污染、操作误差等等因素，特别是污染，我们能排除的往往都只是你想到的，还有很多是一时想不到的；。

 3、在Ct值无法判断阴性或阳性的情况下（接近或略高于判定阴性值时，有扩增曲线，但Ct值较大如37、38）如何下结论？

 一般情况结论根据原来定的标准下，比如原来设定CT>35为阴性，那当CT为36时就不要特意调整标准。确定其为阴性就可以了。

如果使用标准的检测试剂盒，只需要按说明书来就操作就可以，判断结果同样，如果还想探究其中的阴性可能漏检的问题，应该用其他方法，而不能用这个试剂盒了。

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