上期向大家分享了定量PCR中，质粒作为标准分子为何要线性化？本期我们继续深入了解荧光定量PCR实验相关的知识。

一、扩增曲线本底不断升高是什么原因?

1、试剂质量差是主要原因。

2、模板不纯是一个重要原因，用ddH₂O稀释10倍以上（一定不要用TE稀释，要不然可能会更差），问题基本解决；

3、如果模板稀释后基线还有一定的上升，结果分析时可以将基线从6以上设，避开初始的几个上升厉害的循环；

建议：要根本解决此问题请用质量可靠的试剂。

二、分子信标做的阴性对照，曲线为一条斜线，什么原因？

出现这种情况很可能是试剂的问题，换了试剂就好了。其他就是探针设计的问题，还有反应液体试剂酶离子调整。

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