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08-28 2023

知识梳理||DNA指纹图谱

发布者:本网站 浏览次数:633

DNA指纹图谱最早在1985年由英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys提出,Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针,同人体核DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为“DNA指纹”,意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。众多“DNA指纹”组成“DNA 指纹图谱”。


多种分子标记都可被用于DNA图谱构建,其中SNPs标记由于在基因组上分布广、稳定和遗传力高等特点,现阶段被广泛用于构建DNA指纹图谱。DNA指纹图谱对于品种特异性和真实性鉴别、种子纯度鉴定具有重要意义。本期小编给大家带来DNA指纹图谱的构建思路


HVBO GENE


测序策略




技术路线


1、样本搜集


选择有参考基因组的样本进行收集。


2、实验流程


将样本提取DNA,打断成350bp小片段构建文库,文库质检合格后上机测序。


3、技术原理路线



HVBO GENE


结果展示


1、SNP位点筛选


与参考基因组进行比对后,获得初始SNPs。针对初始SNPs,首先根据测序深度、比对质量值、基因型质量值、位点缺失率、最小等位基因频率、杂合率等进行过滤,获得高质量的群体共有SNPs。


然后,根据LD连锁强度 (r2)过滤掉连锁紧密的SNPs,最终获得高质量的独立SNPs。



2、SNP位点评估


为了评估建立的指纹标准能否有效检测群体的遗传多样性,针对样品种质资源,分别利用高质量的群体共有SNPs、指纹标准SNPs进行系统进化分析和PCA主成分聚类分析;


为了验证建立的指纹标准的检测效果,进行群体遗传相似度分析。


SNP位点评估示例[1,2]


3、构建DNA指纹图谱


基于前期SNPs位点过滤、筛选可以构建指纹图谱的SNPs标记,并进行系统发育树、主成分分析和遗传相似性等评估,获得的最终的SNPs标记进行区分不同的材料,构建DNA指纹图谱。


DNA指纹图谱示例1


DNA指纹图谱示例2[3]




结语


如同人类的指纹作为身份标识一样,植物的DNA指纹图谱为其贴上了“分子身份证”,构建植物品种DNA指纹图谱,对于品种鉴定与知识产权的保护、品种纯度和真实性检测、品种亲缘关系和分类研究中具有重要意义。


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