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05-25 2019

对未扩增出来的进行二次PCR,再次检测成果。

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SSR(简单重复序列)也称微卫星DNA,其串联重复的核心序列为1~6 bp,其中最常见是双核苷酸重复,如:(CA)n和(TG)n,每个微卫星的核心序列结构相同,重复单位数目10~60个,其高度多态性主要来源于串联数目的不同。SSR标记的基本原理:由于微卫星两端的序列一般是保守的,因此可以通过微卫星的侧翼序列设计引物,通过PCR扩增出长度不同的PCR片段,将PCR产物进行凝胶电泳,根据分离片段的大小决定基因型并计算等位基因频率。

SSR具有以下一些优点:(1)一般检测到的是一个单一的多等位基因位点;⑵微卫星呈共显性遗传,故可鉴别杂合子和纯合子;⑶所需DNA量少。显然,在采用SSR技术分析微卫星DNA多态性时必须知道重复序列两端的DNA序列的信息。如不能直接从DNA数据库查寻则首先必须对其进行测序。